Მოლეკულური დიაგნოსტიკის: რეალურ დროში PCR

ამჟამად, მოლეკულური დიაგნოსტიკის მექანიზმი შემუშავებული პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR), რომელიც იყო ბიძგი განვითარების დიდი რაოდენობით მეთოდები დიაგნოზი დაავადებების საფუძველზე განსაზღვრა გენეტიკური მასალა. ახორციელებს რეალურ დროში PCR გამოყენებით გენი ფრაგმენტი (კერძოდ, ნუკლეინის მჟავის) გამომწვევის, რომელიც არ არის ნაპოვნი სხვა პირები.

პრინციპი PCR არის გამრავლება გარკვეული გამომწვევის დნმ ფრაგმენტი მილიონობით ჯერ მიერ დნმ პოლიმერაზას სპეცრაზმის, მოიხსენიება, როგორც თერმოციკლერი, რომელიც უზრუნველყოფს ციკლური განმეორება ტემპერატურის რეჟიმის მოცემული პროგრამა.

Diagnostics PCR საშუალებას გავიმეორო სერია amplifications, შენარჩუნების აქტივობის. როდესაც გაძლიერება ხდება შეუფერხებლად, ერთი ციკლი რაოდენობის ასლები კონკრეტული ნაჭერი დნმ გამომწვევის ორადგილიანი, შემდეგ ოცდაათი ციკლის - ას ათი. სწორედ ამიტომ, PCR გამოიყენება დიაგნოზი, რათა დადგინდეს, მცირე საკმარისი პათოგენების, იდენტიფიკაციის გარეშე შეუძლებელია იგი.

აღსანიშნავია, რომ რნმ არ შეიძლება იყოს თარგი PCR რეალურ დროში. ამიტომ, რათა აღმოაჩინოს ვირუსული რნმ ადრე გაძლიერება უნდა დნმ კორელაციაშია შესაბამის ფრაგმენტი. პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის საშუალებას იძლევა აწარმოოს და რნმ საზომი გამომწვევის. ინფორმაცია ამგვარად მიღებული გამოიყენება ეფექტურობის მონიტორინგი თერაპიის და შეფასების კლინიკური პროგნოზი.

გარდა ამისა, რეალურ დროში PCR არ საჭიროებს დამატებით ქმედებებს დეშიფრაციის სამიზნე დნმ ან amplicons, რომელიც ემსახურება, როგორც ბარიერი სწორი დიაგნოზი და გამოიწვიოს ცრუ შედეგები. ეს მიდგომა შესაძლებელს ხდის, რომ არ გამოიყენოს ელექტროფორეზი ნაბიჯი, რომელიც იწვევს რისკის შემცირების პროდუქტები პოლიმერიზაციის ჯაჭვური რეაქცია. გარდა ამისა, იმის გამო, რომ შემცირება რაოდენობის მანიპულაციები აგენტი, ამცირებს დროს კვლევა, ეს ამარტივებს პროცესში, ამცირებს ალბათობას შეცდომები. PCR ასევე გაძლევთ საშუალებას თავდაპირველი რაოდენობის ასლები დნმ გამომწვევის კლინიკური სასამართლო, რათა დაეხმაროს იდენტიფიცირება პერიოდს გამწვავების და დროულად მიიღოს ზომები, რათა განკურნოს პაციენტი.

დღეს, არსებობს დიდი რაოდენობით გაძლიერება მეთოდები ჩაწერა რეალურ დროში. ყველაზე ხშირად გამოყენებული სხვადასხვა ტექნიკის გამოყენებაზე amplicon კორელირებს fluorogenic probes, რადიაციული ინტენსივობის, რომელიც დამოკიდებულია დაგროვების amplicon და ჩაწერა რეალურ დროში საშუალებით სპეციალური მოწყობილობის მოუწოდა thermocycler ოპტიკური მოდული. ეს უზრუნველყოფს მაღალი დონის მგრძნობელობის ანალიზი. ამავე PCR პროდუქტი შეიძლება აღმოჩენილი, ერთად დიდი რაოდენობით პროდუქტები, იმ დროს, როდესაც გამოყენებით ელექტროფორეზი ის ზოგიერთ შემთხვევაში არ შენიშნა.

By PCR გამოყენებით დადებითი და უარყოფითი კონტროლი ნიმუშები რეალურ დროში. ამდენად, დადებითი და უარყოფითი ნიმუშები კვლევა ცალკე ნიმუშები, კონტროლის ნიმუში, სადაც დანერგილია ყოველი ასეთი ნიმუში და გადის ყველა ანალიზი ნაბიჯები.

დღეს, არსებობს დიდი რაოდენობით მოწყობილობები ახორციელებს პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის. ესენია Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid და Roche. თითოეულ მათგანს აქვს დადებითი და უარყოფითი მხარეები

აღსანიშნავია, რომ PCR - მეთოდი დიაგნოზი გამოიყენება ფართომასშტაბიანი სამეცნიერო, კვლევითი და დიაგნოსტიკური ცენტრები მთელს მსოფლიოში, რადგან ეს საშუალებას აძლევს განახორციელოს უშუალო შედეგების ინტერპრეტაციას.