Მიკრობიოლოგიური მეთოდები სასწავლო წყლის, ნიადაგის და ჰაერის

მიკროორგანიზმები - პატარა, ძირითადად ერთუჯრედიანი არსებები, რომლებიც გავრცელებული ბუნებაში. ისინი გვხვდება ყველა მედიაში (ჰაერი, ნიადაგი, წყალი) ადამიანისა და ცხოველების, მცენარეებში.

თვისებრივი მრავალფეროვნება და ნომერი ორგანიზმების დამოკიდებული პირველ რიგში კვების ნაერთები. მაგრამ ეს ასევე მნიშვნელოვანია, როგორც ტენიანობა, ტემპერატურა, aeration და ქმედება მზის და სხვა ფაქტორები.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. მეთოდები სანიტარული და მიკრობიოლოგიური კვლევების ბუნებრივი მედია შეუძლია აღმოაჩინოს თანდასწრებით პათოგენების და განსაზღვროს მათი ოდენობა შესაბამისად მიღებული შედეგები, განავითაროს ზომები, რათა ამოიღონ ან თავიდან ინფექციური დაავადებები. გარდა ამისა, რაოდენობრივი ანგარიშზე საჭირო ეკოსისტემის მოდელირება და განვითარების ბუნებრივი პროცესების მართვა. . მოდი, კიდევ რა მეთოდები მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა.

ნიადაგის

იგი განიხილება, მეცნიერები როგორც ერთ-ერთი შესაძლო მარშრუტები ინფექციური პათოლოგიები. With სეკრეტის ადამიანის ან ცხოველის პაციენტი ნიადაგის გადასვლას პათოგენების. ზოგიერთი მათგანი, კერძოდ, სპორების, შეიძლება არსებობს ნიადაგის დიდი ხნის განმავლობაში (ზოგჯერ ათწლეულების განმავლობაში). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). ნიადაგის შემოდგომაზე პათოგენების ისეთი საშიში ინფექციების, როგორიცაა ტეტანუსის, ჯილეხი, ბოტულიზმის, და სხვ. მეთოდები სანიტარულ-მიკრობიოლოგიური კვლევის ნიადაგის იძლევა საშუალებას განისაზღვროს "მიკრობული რაოდენობა" (ნომერი მიკროორგანიზმების ნიადაგის გრამი) და coli ინდექსი (რაოდენობის E. coli) .

ნიადაგის ანალიზი: მიმოხილვა

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. მეთოდები მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა ნიადაგი უნდა იყოს, პირველ რიგში, მიეკუთვნება პირდაპირი მიკროსკოპია და კულტურა მყარი საკვები საშუალო. პოპულაციები მიკროორგანიზმები და მათი ჯგუფების, რომ ბინადრობს ნიადაგში, განსხვავებული ტაქსონომიური სტატუსი და ეკოლოგიური ფუნქციები. მეცნიერების, ისინი გაერთიანებულია ქვეშ ზოგადი ტერმინი "ნიადაგის biota". პრაიმერი - ჰაბიტატების დიდი რაოდენობით მიკროორგანიზმები. In გრამი ნიადაგის იმყოფება, 1-დან 10 მილიარდ მათი საკნები. ამ გარემოში, აქტიურად რღვევა ორგანული საკითხზე, რომელშიც მონაწილეობას სხვადასხვა საპროფიტული მიკროორგანიზმების მიმართ.

მიკროსკოპული გამოკვლევების მიკრობიოლოგიური მეთოდი: ნაბიჯები

ანალიზი საშუალო იწყება შერჩევა. ამ მიზნით, ადრე peeled და გახეხილი ალკოჰოლის დანა (შოველ შეიძლება გამოყენებულ იქნას). ამის შემდეგ, მომზადება. შემდეგი ნაბიჯი - დათვლა უჯრედების ნახატი ნაცხი. განვიხილოთ თითოეული ნაბიჯი ცალკე.

შერჩევის

ანალიზი ნიადაგის, როგორც წესი, ნიმუში აღებული სიღრმე მთელი ფენა. პირველი ამოღებულ 2-3 სმ ზემოთ ადგილზე, როგორც ეს შეიძლება იყოს წარმოდგენილი უცხო მიკროფლორას. ამის შემდეგ, ფართობი ადგილზე შეისწავლა მიიღოს მონოლითი. ხანგრძლივობა თითოეული მათგანი უნდა შეესაბამებოდეს სისქე ფენის, რომელიც გსურთ ნიმუში.

ნაკვეთი 100-200 კვ. 7-10 მ შერჩეული ნიმუშები. წონა თითოეული - იმისათვის, 0,5 კგ. ნიმუშები უნდა იყოს შერეული საფუძვლიანად ტომარა. მერე საშუალო ნიმუში მასით დაახლოებით 1 კგ. უნდა განთავსდეს პერგამენტზე (სტერილური) პაკეტი ერთვის ქსოვილის ტომარა. მანამდე მიმართული ანალიზი ნიმუში ინახება მაცივარში.

კვლევის მომზადება

გამოიწვია ნიადაგის მოსაკლავად მშრალი მინის. მისი წინასწარი wipe ერთად ალკოჰოლის და დამწვრობის ზემოთ burner. ერთად spatula ნიადაგის საფუძვლიანად შერეული და გაფართოვდა თანაბრად. ეს არის სავალდებულო ამოიღონ ფესვები და სხვა უცხო ელემენტებს. ამისათვის, გამოიყენოთ tweezers. ადრე ოპერაციის პინცეტები და spatula ზემოთ burner გაუჩნდა და დაშვებული გაცივდეს.

სხვადასხვა ნიადაგის ნაკვეთები გავრცელებულია მინის, შერჩეული მცირე ნაწილი. ისინი იწონიდა წელს ფაიფურის კერძი ტექნიკური მასშტაბით. является специальная обработка образца. სავალდებულო ნაბიჯი მიკროსკოპული მეთოდი მიკრობიოლოგიური კვლევების სპეციალური დამუშავება ნიმუში. 2 უნდა იყოს მომზადებული წინასწარ, სტერილური კოლბაში. მათი ზომა არ უნდა აღემატებოდეს 250 მლ. ერთ-ერთი კოლბები შეედინება 100 მლ ონკანის წყალი. იმის გამო, რომ იგი იღებს 0.4-0.8 მლ თხევადი ნიმუში ნიადაგის და მოზელილი პასტა. ნარევი უნდა rubbed ერთად თითი ან რეზინის pestle 5 წუთი.

წყლის პირველი კოლბაში იქნა გადაყვანილი ნიადაგის მასობრივი ცარიელი კოლბაში. გარდა ამისა, rubbing მის უკან. მას შემდეგ, რაც ეს მასა გადაეცემა კოლბაში ახლოს burner ალი. კონტეინერი ნიადაგის შეჩერების შეირყა წლის shaker 5 წუთი. ამის შემდეგ, მას ეძლეოდა მოაგვაროს დაახლოებით 30 წამში. ეს არის საჭირო იმისათვის, რომ დიდი ნაწილაკების დალექვა. შემდეგ ნახევარ წუთში მასობრივი გამოიყენება ემზადება მომზადება.

უჯრედების ფიქსირებული ნაცხი

, разработанному Виноградским. პირდაპირი მიკროსკოპული კვლევა ნიადაგის ხორციელდება მეთოდით მიკრობიოლოგიური კვლევები, შემუშავებული Vinogradskii. გარკვეული მოცულობის შეჩერების იყო დათვლილი რაოდენობის უჯრედები მიკროორგანიზმები. სწავლა ფიქსირებული ნაცხი შეგიძლიათ შეინახოთ ნარკოტიკი გრძელვადიანი და შეასრულოს გათვლებით ნებისმიერ დროს.

მომზადება ნარკოტიკების ასეთია. გარკვეული რაოდენობის slurry (როგორც წესი, 0.02-0.05 მლ) მიმართა მიკროპიპეტი გადატანა slide. ამ გადაწყვეტა დაემატა წვეთი აგარ-აგარი (პოლისაქარიდების agaropectin ნარევი და agarose მოპოვებული ყავისფერი და წითელი წყალმცენარეები შავი ზღვის), გამოიწვია სწრაფად და მოედო ფართობი 4-6 კვ. სმ. Pap საჰაერო გამხმარი და ფიქსირებული 20-30 წუთი. ალკოჰოლის (96%). შემდეგი, ნარკოტიკების მოზელილი გამოხდილი წყალი და მოთავსებული p-p carbolic erythrosine 20-30 წუთი.

მას შემდეგ, რაც შეღებვა, ეს არის გარეცხილი და გამხმარი ჰაერში. უჯრედების შესრულებული საწყისი immersion ობიექტივი.

სათესი მყარი მედია

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. მიკროსკოპული მეთოდები მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა შეუძლია აღმოაჩინოს დიდი რაოდენობით მიკროორგანიზმები. თუმცა, მიუხედავად ამისა, მეთოდი inoculation არის ყველაზე გავრცელებული პრაქტიკაში. მისი არსი მდგომარეობს სათესლე ოდენობით ნარკოტიკების (ნიადაგის შეჩერების) პეტრი კერძი მყარი საშუალო.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. ეს მეთოდი მიკრობიოლოგიური კვლევის ითვალისწინებს არა მხოლოდ რაოდენობით, არამედ ჯგუფში, და რიგ შემთხვევებში, და სახეობების მიკროსკოპული ფლორა. დათვლის კოლონიები წარმოებული, როგორც წესი, ბოლოში Petri კერძი გადამდები ნათელი. On გათვლილი ტერიტორიაზე განთავსებული მარკერი ან მელნის dot.

წყლის ანალიზი

მიკროფლორის წყლის ორგანოს, როგორც წესი, ასახავს მიკრობული შემადგენლობის ნიადაგის გარშემო. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. ამ კონტექსტში, მეთოდები სანიტარულ-მიკრობიოლოგიური ანალიზი წყლის და ნიადაგის განსაკუთრებულ პრაქტიკული მნიშვნელობის შესწავლა სახელმწიფო კონკრეტული ეკოსისტემას. წყალი შეიცავს, როგორც წესი, კოკები, როდ ფორმის ბაქტერიების.

ანაერობები წყალში აღმოაჩინეს მცირე რაოდენობით. როგორც წესი, ისინი გამრავლების ბოლოში ორგანოების წყალი, ტალახი, მონაწილეობა პროცესში გამწმენდი. მიკროფლორა ოკეანეები და ზღვები უპირატესად წარმოდგენილია halophytic (halophilic) ბაქტერიები.

წყალი, არტეზიული ჭების პრაქტიკულად არ არსებობს მიკროორგანიზმები. ეს არის იმის გამო, ფილტრაცია მოცულობა ნიადაგის ფენა.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. ჩვეულებრივი მეთოდებით მიკრობიოლოგიური წყლის კვლევის ითვლება განმარტება მიკრობული და coli-ტიტრი ან თუ ინდექსი. პირველი მაჩვენებელი განსაზღვრავს ბაქტერიების რაოდენობა 1 მლ სითხე. კოლი ინდექსი წარმოადგენს რაოდენობა coliforms იმყოფება ლიტრი წყალი, და თუ ტიტრი - მინიმალური რაოდენობის ან მაქსიმალური განზავება სითხე, რომელიც მათ ჯერ კიდევ შეიძლება აღმოჩენილი.

განსაზღვრა მიკრობული ნომერი

ეს მეთოდი სანიტარული მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა წყლის ასეთია. 1 მლ წყალი განსაზღვრული რაოდენობის mesophilic და ფაკულტატური ანაერობები (შუალედური) აერობები შეუძლია ხორცი-peptone agar (პირველადი საშუალო) 37 deg. დღის განმავლობაში შექმნას კოლონიები ჩანს ერთი magnification 2-5 გვ. ან შეუიარაღებელი თვალით.

является посев. საკვანძო საფეხური მეთოდი მიკრობიოლოგიური ანალიზი წყლის დათესეს. იმის გამო, რომ თითოეული ნიმუში ითესება მინიმუმ 2 სხვადასხვა ტომი. როდესაც ონკანის წყალი ანალიზი თითოეული თასის მზადდება 1-0.1 მლ სუფთა თხევადი და დაბინძურებული 0.01-0.001 მლ. იყიდება inoculation 0.1 მლ ან მცირე მოცულობის სითხის განზავდეს გამოხდილი (სტერილური) წყალი. თანმიმდევრულად მომზადება ათობითი განზავებით. 1 მლ თითოეული მათგანი კეთდება ორი პეტრი კერძები.

მეცხოველეობა სავსე საკვები აგარი. ეს უნდა დნება, და მაგარი 45 deg. მას შემდეგ, რაც აღვივებს, აქტიური საშუალო დარჩა ჰორიზონტალურ ზედაპირზე for გამაგრდება. 37 გრადუსი. კულტურების გაიზარდა მთელი დღის განმავლობაში. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. განხილული მეთოდი მიკრობიოლოგიური წყლის კვლევის ითვალისწინებს შედეგები იმ კერძები, სადაც ნომერი კოლონიები სპექტრი 30 300.

საჰაერო

იგი ითვლება სატრანზიტო საფუძველი მიკროორგანიზმები. являются седиментация (оседание) и аспирация. ძირითადი მეთოდები მიკრობიოლოგიური გამოკვლევები საჰაერო დალექვის (დაბინავება) და მისწრაფება.

მიკროფლორა ჰაერი უკანონოდ დაყოფილი ცვლადი და მუდმივი. პირველ ჯგუფში შედის საფუარი, ქრომოგენურ cocci, სპოროვანი bacillus coli და სხვა მიკროორგანიზმები, რომლებიც რეზისტენტულია საშრობი, ექსპოზიციის ნათელი. წარმომადგენლები ცვლადი მიკროფლორის გადასვლას ჰაერში ჩვეულ გარემოს, ხანგრძლივი შეინარჩუნოს მათი სიცოცხლისუნარიანობა.

ჰაერში დიდ ქალაქებში მიკროორგანიზმების გაცილებით მეტია, ვიდრე ჰაერი სოფლად. მეტი ზღვას, ტყეების ძალიან ცოტა ბაქტერიები. ჰაერის გამწმენდი შეუწყობს ნალექების: თოვლი და წვიმა. შიდა მიკრობები უფრო მეტი, ვიდრე ღია სივრცეები. მათი რიცხვი გაიზრდება ზამთარში იმ შემთხვევაში, რეგულარული ვენტილაცია.

დალექვის

считается простейшим. ეს მეთოდი მიკრობიოლოგიური კვლევის მიკრობიოლოგია ითვლება მარტივი. იგი ეფუძნება მოგვარებით წვეთები და ნაწილაკების agar ზედაპირზე ღია Petri კერძი ქვეშ სიმძიმის. დალექვის საშუალებას არ შეუძლია ზუსტად განსაზღვროს ბაქტერიების რაოდენობა ჰაერში. ფაქტია, რომ ღია თასი დაჭერა ჯარიმა ფრაქციას მტვრის ნაწილაკები და წვეთები ბაქტერიული საკმაოდ რთულია. ზედაპირზე შეინარჩუნა ძირითადად დიდი ნაწილაკების.

ეს მეთოდი არ გამოიყენება საჰაერო ანალიზი. ეს გარემო ხასიათდება დიდი რყევების სიჩქარე ჰაერის ნაკადის. Sedimentation შეიძლება, თუმცა, უნდა იყოს გამოყენებული, რომ არ არსებობს უფრო დახვეწილი მოწყობილობების ან ელექტროენერგიის წყარო.

რაოდენობის განსაზღვრის მიკრობული მიერ შესრულებული Omelyansky მეთოდი. შესაბამისად, ამასთან, 5 წუთი ფართობი 100 კვადრატული agar. სმ აგვარებს ბაქტერიების რაოდენობა იმყოფება 10 ლიტრი ჰაერი.

მიწერე 535 "გაერთიანების მიკრობიოლოგიური მეთოდები გამოძიება"

ბაქტერიოლოგიური ანალიზი მნიშვნელოვანი ადგილი უკავია კომპლექსში კლინიკური და ლაბორატორიული საქმიანობა, რომლის მიზანია დიაგნოსტიკა, პრევენცია და მკურნალობა სხვადასხვა ინფექციური დაავადებების. თუმცა, სასწავლო გარემოს, ისინი არ შემოიფარგლება.

განსაკუთრებით მნიშვნელოვანია ბაქტერიოლოგიური ანალიზი ბიოლოგიური მასალის საავადმყოფოებში. იყიდება კვლევა ჯანდაცვის ობიექტების, გაზრდილი მოთხოვნები. იმ მიზნით, რომ ბრძანება "გაერთიანების მიკრობიოლოგიური მეთოდები გამოძიება" გაუმჯობესება ბაქტერიოლოგიური ანალიზი, ხარისხის გაუმჯობესება და ეფექტურობა მიკრობიოლოგიური დიაგნოსტიკა.

მიკროსკოპული გამოკვლევა ნაცხი ქალები

ეს არის ძირითადი მეთოდი ანალიზის დიაგნოზი ინფექციების, სქესობრივი გზით გადამდები ინფექციების და ოპორტუნისტული ინფექციების (ოპორტუნისტული ბაქტერიების).

მიკროსკოპული ანალიზი შევაფასოთ ხარისხობრივი და რაოდენობრივი შემადგენლობა მიკროფლორას, ამოწმებს შერჩევა. მაგალითად, თანდასწრებით ვაგინალური ეპითელიუმის in swabs აღებული საშვილოსნოს ყელის არხის მიუთითებს წესების დარღვევის შერჩევა ბიოლოგიური ნიმუში.

განცხადებაში ნათქვამია, რომ მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა ამ შემთხვევაში, როგორც წესი, მოჰყვა გარკვეული პრობლემები. ისინი უკავშირდება იმ ფაქტს, რომ ქვედა სასქესო ტრაქტის ნორმალური მრავალფეროვანი მიკროფლორას, რომელიც მერყეობს სხვადასხვა ასაკის. გაუმჯობესების ეფექტურობის კვლევა და შევიმუშავეთ სტანდარტიზებული წესები.

დიაგნოსტიკა ვირუსული ინფექციების

ეს ხორციელდება მეთოდები გამოვლენის RNA და დნმ პათოგენების. ისინი ეფუძნება პირველ რიგში განსაზღვრის nucleotide sequences პათოლოგიური მასალა. ამ მიზნით, მოლეკულური კვლევა. ისინი ხელოვნურად ნუკლეინის მჟავების შეავსებს (დამატებითი) ვირუსული მჟავები შეაფასა რადიოაქტიური label და ბიოტინი.

თავისებურება მეთოდი მეორდება გადაწერა კონკრეტული დნმ ფრაგმენტის შემცველი რამდენიმე ასეული (ან ათეული) ნუკლეოტიდი წყვილი. რეპლიკაცია (ასლის გადაღება), რომ გაფართოება შეიძლება დაიწყოს მხოლოდ გარკვეულ ერთეული. პრაიმერს (პრაიმერს) გამოიყენება შექმნა. ისინი სინთეზირდება Oligonucleotides.

PCR დიაგნოსტიკა (პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია) არის მარტივი აღსრულება. ეს მეთოდი საშუალებას გაძლევთ სწრაფად მიიღოთ შედეგი გამოყენებით მცირე პათოლოგიური მასალა. გამოყენება PCR დიაგნოსტიკა განსაზღვრავს მწვავე, ქრონიკული და ლატენტური (ფარული) ინფექციები.

როდესაც მგრძობიარობა ეს მეთოდი ითვლება უფრო სასურველია. თუმცა, მიმდინარე ტესტი სისტემები არ არის საიმედო საკმარისი, ასე რომ PCR დიაგნოზი არ შეიძლება მთლიანად შეცვალოს ტრადიციული მეთოდებით.